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分析ELISA試劑盒操作的幾個小技巧
發布時間:2021-09-23   點擊次數:255次
  ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。為了保證ELISA試劑盒實驗質量,我們需要掌握一些小技巧以助于實驗的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?
  如若掌握了這些實驗技巧之后,在做ELISA實驗中,試驗起來會更熟練,大大的降低了實驗過程中的風險,ELISA試劑盒實驗的入門新手掌握了這些知識后,操作起來都會快的多。
  ELISA試劑盒的相關操作技巧如下:
  1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
  2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
  3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
  5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
  6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
  7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
  8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
  9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
  10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
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