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使用白介素ELISA試劑盒要注意這些細節
發布時間:2022-02-22   點擊次數:79次
  白介素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法作為測定的方法時,試劑盒的組成一般包括:已包被單抗的酶標板:一塊,有96孔的,也有48孔的,可拆缷,外面有鋁箔袋密封,打開后有干燥劑,實驗時暫未使用的酶標條要連帶干燥劑密封好,放在4℃冰箱中妥善保存。今天我們主要介紹其測定原理。
  現在白介素ELISA檢測試劑盒除非是測定抗體的以外,一般使用的是雙抗體夾心法,此種方法大多數用的是增強的雙抗體夾心法,即使用生物素-親和素系統,還有少數的指標可能使用競爭法,這類方法適用于半抗原的測定。
  具有復雜結構的多表位蛋白抗原,其雙抗體夾心法中的一個抗體必須用單抗,否則背景很高。當然如果兩個都是單抗(這兩個單抗針對不同表位),那么測定的線性范圍就較寬,試劑盒性能就較好;一個用單抗,一個用多抗,測定的靈敏度會較高。
  某些簡單的化合物用白介素ELISA檢測試劑盒測定時,因為沒有兩個或以上的表位,一般只能作為半抗原,只能用競爭法測定。如果你發現有測定簡單化合物用雙抗體夾心法作測定原理時,這個試劑盒你就要懷疑了。另外還要說明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區別。
  一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形,隨著待則標本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后,測定吸光度即隨抗原濃度的增加而開始下降直至不顯色,即所謂的“鉤狀效應”,也就是我們在免疫沉淀試驗中所稱的“帶現象”。所以當使用一步雙抗體夾心法時,樣品濃度太高,有時會出現測不出來的現象,此時要作適當的稀釋才能準確測定。
  試驗中,白介素ELISA檢測試劑盒的每一步操作都有可能影響實驗的成功與否,所以一定要確保操作方法正確,尤其要注意相關的細節問題!
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